بررسی تنوع ژنتیکی و بیوشیمیایی در طی واکشت های مکرر کالوس های توتون ‍

در این تحقیق به منظور بررسی تنوع سوماکلونالی در طی واکشت های مکرر کالوس های توتون اقدام به کشت ریز نمونه- های برگ و ساقه گیاه توتون ( رقم چپق) در محیط کشت ms که حاوی 4 میلی گرم بر لیتر 2,4-d و 5/0 میلی گرم بر لیتر کینتین بود گردید. بعد از اینکه کالوس ها رشد کردند در محیط کشت دیگر با همان غلظت های هورمونی واکشت شدند. بعد از واکشت چهار، کالوس ها به محیط کشت باززایی ms با غلظت های هورمونی شامل 5/0 میلی گرم بر لیتر 2,4-d ، 4 میلی گرم بر لیتر کینتین ، 1 میلی گرم بر لیتر زئاتین منتقل شد. بعد از تشکیل گیاهچه ها از گیاه اولیه و گیاه باززایی شده ، استخراج dna به منظور بررسی تنوع سوماکلونالی انجام گرفت. و در کل از 20 پرایمر تصادفی و تکنیک rapd-pcr برای بررسی این تنوع استفاده گردید. الگوی الکتروفورزی نتایج rapd وجود پلی مورفیسم را در باند های dna تکثیر شده با چهار پرایمر تصادفی opa-10 ، opr-12، opc-09، ops-11 نشان دادند.وجود تغییرات در ژنوم توتون به خاطر قرار گرفتن طولانی مدت در محیط کشت می باشد .